La biopsia hepática es la prueba de referencia para el diagnóstico de la enfermedad hepática. La comprensión de las características caracterizadas en un informe anatomopatológico mejora la orientación del tratamiento y la selección de estrategias de soporte vital.
La biopsia hepática es la prueba de referencia para el diagnóstico de la enfermedad hepática.
Las biopsias hepáticas con aguja gruesa (especialmente de 18 G) ecoguiadas pueden producir muestras demasiado pequeñas y fragmentadas para un diagnóstico preciso debido a la falta de unidades acinares representativas (se deben muestrear al menos 15 tríadas portales). Además, las biopsias con aguja por lo general solo se recogen de los lóbulos hepáticos del lado izquierdo muestreados de forma más segura, que pueden pasar por alto las lesiones que afectan diferencialmente a los lóbulos hepáticos (p. ej., colangiohepatitis en los gatos).
Las biopsias con aguja a ciegas realizadas sin guía ecográfica son peligrosas y se desaconsejan. Se prefieren las biopsias laparoscópicas usando pinzas de cesta artroscópica y las biopsias quirúrgicas en cuña, ya que se pueden obtener muestras de tamaño adecuado de forma fácil y segura a partir de múltiples lóbulos hepáticos. Esta estrategia garantiza que un número suficiente de tejidos y muestras de diversas localizaciones proporcionará una representación precisa de la enfermedad. Estos métodos también permiten la evaluación macroscópica del hígado.
En particular, los métodos laparoscópicos no se recomiendan cuando se sospecha una enfermedad del colédoco o de la vesícula biliar que pueda necesitar un procedimiento biliar descompresivo, colecistectomía, coledocotomía, extracción de colelitos o colecistoenterostomía (es decir, colecistoduodenostomía, colecistoyeyunostomía).
La biopsia hepática debe realizarse siempre, incluso si el proceso patológico predominante es una anomalía biliar evidente, porque las lesiones histológicas hepáticas subyacentes guiarán el tratamiento recomendado. Se deben tomar muestras de cortes de hígado distantes a la vesícula biliar para evitar la acumulación de glándulas peribiliares en el tejido adyacente a la vesícula biliar, que pueden confundirse con estructuras malformativas del conducto biliar. Los cortes de zonas hepáticas distantes también determinarán la amplitud de las lesiones hepáticas no asociadas con reacciones inflamatorias colecísticas locales.
También es importante realizar una biopsia del hígado macroscópicamente normal cuando se identifican lesiones focales. Esta práctica consigue lo siguiente:
Asegura la caracterización de la histología hepática normal.
Determina si coexiste una enfermedad hepática subyacente.
Investiga la histología del hígado distante a la vesícula biliar en animales sometidos a colecistectomía.
Proporciona múltiples muestras del lóbulo hepático necesarias para confirmar la sospecha de displasia microvascular (DMV) (porque esta lesión es variable entre los lóbulos hepáticos).
La evaluación de biopsia de rutina debe incluir lo siguiente:
Examen de una impronta citológica.
Tinción de Gram, si se detecta citológicamente inflamación supurativa o piogranulomatosa.
Tinción e interpretación rutinaria de H-E.
Tinción con reticulina, que revela el armazón de soporte de los cordones hepáticos y define las regiones de colapso o lesión parenquimatosa.
Tinción con tricrómico de Masson para confirmar la presencia y gravedad del depósito de tejido conjuntivo fibrilar.
Tinción con azul de Prusia para identificar la retención de hierro en las células de Kupffer (macrófagos fijos) y rara vez en los hepatocitos (esta tinción ayuda a confirmar las regiones de afectación lobular en la inflamación, la activación de las células de Kupffer y la hemocromatosis rara [acumulación de hierro predominantemente en los hepatocitos]).
Tinción de rodanina para cobre, que confirma y puede usarse para cuantificar el cobre con escaneo digital de cortes teñidos con rodanina.
Cultivos de bacterias aerobias y anaerobias de hígado y bilis.
Si es necesario, cuantificación de los metales hepáticos (concentraciones de cobre, hierro y zinc, ya que estos valores pueden ayudar a evaluar el riesgo de lesión oxidativa y la necesidad de suplementación con zinc).
La cuantificación de metales se realiza mejor mediante espectroscopia de absorción atómica, considerada la prueba de referencia para la cuantificación de tejidos de cobre, el método de validación para la cuantificación digital de cobre. Los valores de cobre discordantes con la distribución de cobre teñido con rodanina y el análisis de cobre por cuantificación digital se han encontrado repetidamente con cobre cuantificado usando análisis de espectrometría de masas de plasma acoplado inductivamente (muestras analizadas por tres laboratorios diferentes). Debe reservarse una muestra de tejido (fijada con formol) para otros estudios de casos específicos, como tinciones de inmunohistoquímica especiales o para pruebas de PCR para agentes infecciosos.
Antes de la biopsia deben evaluarse las posibles alteraciones de la coagulación mediante una revisión meticulosa de la anamnesis, la exploración física, el frotis sanguíneo (para confirmar un recuento de plaquetas ≥100 000 plaquetas/mcL), el perfil de coagulación rutinario (tiempo de protrombina [TP], tiempo de tromboplastina parcial activado [TTPA]), la actividad del factor de von Willebrand (vWF) en razas de alto riesgo y el tiempo de hemorragia de la mucosa oral (BMBT). Las evaluaciones de rutina de la coagulación tienen baja fiabilidad para detectar el riesgo de hemorragia, siendo el BMBT más relevante cuando se realiza inmediatamente antes de un procedimiento de biopsia. Los animales con sospecha de tener tendencia hemorrágica deben tratarse con vitamina K1 (0,5-1 mg/kg, SC o IM, repitiendo a las 0, 12 y 24 horas antes del muestreo de tejido).
Si el BMBT es >5 minutos y la biopsia hepática se considera imprescindible para el diagnóstico, está indicada la transfusión de plasma fresco congelado con revaluación del BMBT para valorar el efecto coagulante alcanzado.
La administración de acetato de desmopresina (0,3-1 mcg/kg diluido en solución salina) también ayuda de forma aguda a controlar el sangrado excesivo. La desmopresina aumenta el FvW plasmático (2 veces por encima del valor basal) en 1 hora y la actividad plasmática del factor VIII; sin embargo, el efecto es de corta duración.
Las limitaciones en la utilidad de las inyecciones de desmopresina incluyen las siguientes: solo puede usarse una vez, ya que agota el FvW preformado y, aunque la desmopresina puede iniciar un efecto hemostático en perros con deficiencia de FvW tipo 1 (deficiencia cuantitativa parcial), no puede detener la hemorragia debido a un defecto del FvW o deficiencia completa de FvW. La inyección de desmopresina también se ha utilizado de forma urgente durante la biopsia hepática para detener el sangrado excesivo. El mecanismo de esta respuesta probablemente va más allá de la simple liberación de monómeros del FvW y permanece incompleto.